辽东楤木Araliaelata(Miq.)Seem.，又名龙牙楤木，为五加科（Araliaceae）楤木属AraliaLinn.多年生落叶灌木，主要分布于中国的东北地区。作为中药材楤木以根皮和茎皮入药，用于胃炎、肝炎、关节炎等症的治疗[1]。楤木中含有多种化学活性成分，其中皂苷类成分具有广泛的药理作用，包括抗肿瘤、抗心律失常、抗骨质疏松等活性[2-4]。本课题组前期对楤木70%乙醇提取物的化学成分进行了系统分析，从利用索氏提取器得到的甲醇提取部位中分离得到了齐墩果烷型五环三萜皂苷类单体成分[5]。目前国内外对齐墩果烷型皂苷的生物学活性研究主要集中于抗肿瘤、抗骨质疏松、抗心肌缺血和心肌保护活性等方面，抗炎等活性研究报道较少[6-11]。此外，据报道血小板二磷酸腺苷（ADP）受体亚型P2Y12拮抗剂如替格瑞洛等多种抗血小板药物具有抗炎及保护血管内皮功能等生物活性[12]。本课题组在此研究基础上，选取楤木总皂苷乙醇提取物中量较高的金盏花苷E（图1）为研究对象，对其进行结构改造，设计合成了一系列金盏花苷E拼合替格瑞洛活性片段的结构类似物G1～G5和H1～H5，均为未见文献报道的新化合物；同时采用巨噬细胞RAW.7模型，首次对这些新化合物进行体外抗炎活性评价，以期发现具有深入研究价值的抗炎活性化合物，为中药新药的研发奠定基础。

艾卡（IKA?）C-MAGHS7型磁力搅拌器[艾卡（广州）仪器设备有限公司]；梅特勒-托利多（METTLERTOLEDOAL）电子天平[梅特勒-托利多（北京）精密仪器有限公司]；BrukerAvanceIII型核磁共振波谱仪[布鲁克（北京）科技有限公司]；赛默飞世尔（Thermofisher）LTQ-ObitrapXL液质联用仪（赛默飞世尔科技有限公司）；CO2恒温培养箱（日本Sanoy公司）；IX51倒置荧光显微镜（OLYMPUS公司）；KCjunior微孔板分光光度计（Biotek公司）。

D-葡萄糖（质量分数99.5%）、D-半乳糖（质量分数99.5%）、D-木糖（质量分数98%）、L-阿拉伯糖（质量分数99.5%）、L-鼠李糖（质量分数99.5%）均购自国药集团化学试剂有限公司；齐墩果酸（质量分数＞98%，绵阳东方源生物科技有限公司）；溴苄（BnBr）、1-羟基苯并三氮唑（HOBT）、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐（EDCI）、AMBERLITEIR-（阳离子交换树脂）以及各种胺等均购于EnergyChemical公司；N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）、脂多糖（LPS）、N-1-萘基乙二胺盐酸盐购自Sigma公司；磺胺、磷酸购自国药集团化学试剂有限公司；常规试剂市售分析纯和化学纯，柱色谱用硅胶及薄层色谱用硅胶G、H、GF（青岛海洋化工有限公司）。小鼠巨噬细胞株RAW.7购于美国ATCC公司。

本实验设计的目标化合物是图2中的化合物G1～G5和H1～H5，通过对金盏花苷E的28位进行结构改造，连接含有替格瑞洛的活性片段，同时3位用不同的糖给体进行替换，以考察结构改造对金盏花苷E活性的影响。其中，化合物G1～G5为苷元28位羧基连接含有双羟基保护的替格瑞洛活性片段，3位葡萄糖醛酸基给体分别替换为葡萄糖基（G1）、半乳糖基（G2）、木糖基（G3）、阿拉伯糖基（G4）、鼠李糖基（G5）；化合物H1～H5为苷元28位羧基连接双羟基的替格瑞洛活性片段，3位葡萄糖醛酸基给体分别替换为葡萄糖基（H1）、半乳糖基（H2）、木糖基（H3）、阿拉伯糖基（H4）、鼠李糖基（H5）。

本实验对化合物的合成采用一条7步反应的路线，见图2。以齐墩果酸（A）为起始原料，经苄基保护（B）、Lewis酸催化糖苷化（C1～C5）、催化氢化脱苄基保护（D1～D5）、酰胺化（E1～E5）、胺基侧链酰胺化（F1～F5）、糖基苯甲酰基脱保护（G1～G5）以及脱去甲叉基保护，最终得到目标化合物H1～H5。

金盏花苷E类似物的合成反应路线见图2。

2.3.1糖基给体的合成参考文献报道的合成方法[13-14]，分别以葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖为原料，采用经典的Schmidit法分别制备得到葡萄糖基三氯乙酰亚胺酯给体（a，收率76%）、半乳糖基三氯乙酰亚胺酯给体（b，收率73%）、木糖基三氯乙酰亚胺酯给体（c，收率70%）、阿拉伯糖基三氯乙酰亚胺酯给体（d，收率65%）、鼠李糖基三氯乙酰亚胺酯给体（e，收率68%）。

2.3.2中间体B的合成于mL圆底烧瓶中准确称取齐墩果酸（10.0g，21.8mmol），加入mL二氯甲烷。依次加入四丁基溴化铵（0.8g，2.5mmol）以及50mL碳酸钾（7.4g，53.6mmol）水溶液，搅拌均匀。冰浴下滴加溴苄（3.2mL，26.8mmol），滴毕升温至室温，过夜反应。反应结束后分液，有机相依次用0.1mol/L的稀盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和氯化钠水溶液洗涤，合并有机层，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，石油醚-醋酸乙酯（8∶1）洗脱，分别得到白色固体B（10.8g，收率91%）。

2.3.3中间体C1～C5的合成分别于mL圆底烧瓶中准确称取中间体B（3.3g，6.0mmol）和a（5.8g，7.9mmol），或b（5.8g，7.9mmol），或c（4.8g，7.9mmol），或d（4.8g，7.9mmol），或e（5.0g，7.9mmol）加入50mL无水二氯甲烷溶解，加入0.5g粉末状0.4nm分子筛，在氮气保护下室温搅拌反应1h，随后加入催化量的Lewis酸TMSOTf（60μL，0.3mol）继续反应2h，直至TLC监测反应结束，展开剂为石油醚-醋酸乙酯（8∶1）。加入1.0mL三乙胺淬灭反应。滤过除掉分子筛，滤液浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，石油醚-醋酸乙酯（10∶1）洗脱分别得到白色固体C1～C5。C1：7.0g（收率79.5%，下同）；C2：7.3g（83.0%）；C3：6.4g（82.1%）；C4：6.9g（88.5%）；C5：6.7g（83.8%）。

2.3.4中间体D1～D5的合成分别于mL圆底烧瓶中准确称取中间体C1或C2（3.4g，3.0mmol），或C3或C4（3.0g，3.0mmol），或C5（3.0g，3.0mmol）加入30mL醋酸乙酯溶解，预通氮气3min后，加入10%Pd/C催化剂1.5mg，随后开始通氢气，外浴80℃下缓慢升温至回流反应3h，直至TLC（展开剂为石油醚-醋酸乙酯4∶1）监测反应结束。滤过除掉钯碳，滤液浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，石油醚-醋酸乙酯（3∶1）洗脱分别得到白色固体D1～D5。D1：2.6g（83.3%）；D2：2.8g（89.7%）；D3：2.4g（88.2%）；D4：2.5g（91.9%）；D5：2.3g（84.6%）。

2.3.5中间体E1～E5的合成分别于50mL圆底烧瓶中准确称取中间体D1或D2（1.50g，1.45mmol），或D3或D4（1.30g，1.45mmol），或D5（1.33g，1.45mmol）加入15mL无水二氯甲烷溶解，随后加入HOBT（0.2g，1.46mmol）和EDCI（0.28g，1.46mmol），室温下搅拌反应1h后，于冰浴下滴加4,7,10-三氧-1,13-十三烷二胺（14.5mmol）室温下继续反应4h。TLC（展开剂为石油醚-醋酸乙酯5∶1）监测反应完全后，依次用稀盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥过夜。抽滤，减压蒸干，残余物通过硅胶柱色谱纯化，石油醚-醋酸乙酯（8∶1）洗脱分别得到白色固体E1～E5。E1：1.35g（75.4%）；E2：1.27g（71.0%）；E3：1.27g（79.4%）；E4：1.19g（74.4%）；E5：1.23g（75.9%）。

2.3.6中间体3的合成在mL圆底烧瓶中准确称取酒石酸替格瑞洛（5.0g，21.20mmol），4,6-二氯-5-氨基-2-丙硫基嘧啶（9.3g，25.32mmol）和1,4-二氧六环mL，搅拌5min；加入三乙胺（12.2g，10.59mmol），℃加热回流搅拌反应24h。冷却至室温，TLC（展开剂为石油醚-醋酸乙酯，3∶1）监测反应完全后，用1mol/L盐酸调至pH呈中性，用饱和氯化钠溶液（2×mL）洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，残余物通过硅胶柱色谱纯化，石油醚-醋酸乙酯（4∶1）洗脱得到白色粉末中间体3（7.3g，56.9%）。

2.3.7中间体4的合成在mL圆底烧瓶中准确称取中间体3（7.0g，16.70mmol），再加入乙酸（5.6mL，.20mmol）和醋酸乙酯mL，搅拌下继续滴加20mL亚硝酸钠（1.28g，18.37mmol）水溶液，滴毕，冰浴反应8h。TLC（展开剂为石油醚-醋酸乙酯3∶1）监测反应完全后，用饱和碳酸钾溶液调至pH值为8，有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂，残余物通过硅胶柱色谱纯化，石油醚-醋酸乙酯（4∶1）洗脱得到黄色油状物质中间体4（5.9g，81.9%）[15-16]。

2.3.8中间体F1～F5的合成分别于50mL圆底烧瓶中准确称取中间体E1或E2（1.00g，0.85mmol），或E3或E4（0.94g，0.85mmol），或E5（0.95g，0.85mmol），以及中间体4（0.37g，0.85mmol）。加入mL二氯甲烷搅拌并溶解；缓慢滴加N,N-二异丙基乙胺（0.94mmol），滴毕，于10℃下反应10h。TLC（展开剂为二氯甲烷-甲醇15∶1）监测反应完全后，用1mol/L盐酸调至pH中性，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇（20∶1）洗脱得到白色粉末F1～F5。F1：0.57g（43.5%）；F2：0.63g（47.3%）；F3：0.72g（56.7%）；F4：0.69g（54.3%）；F5：0.61g（47.7%）。

2.3.9目标化合物G1～G5的合成分别于50mL圆底烧瓶中准确称取中间体F1（mg，0.33mmol），或F2（g，0.33mmol），或F3（mg，0.33mmol），或F4（mg，0.33mmol），或F5（mg，0.33mmol），溶于适量的干燥甲醇和二氯甲烷（体积比为3∶1）中，加入5.5mL甲醇钠甲醇（1mol/L）溶液，室温反应6h。TLC（展开剂为二氯甲烷-甲醇8∶1）监测反应完全后，再用阳离子交换树脂调节pH至中性，抽滤蒸干。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇（10∶1）洗脱得到白色粉末G1～G5。G1：mg（64.7%）；G2：mg（81.6%）；G3：mg（78.3%）；G4：mg（71.8%）；G5：mg（67.6%）。

2.3.10目标化合物H1～H5的合成分别于50mL圆底烧瓶中准确称取中间体H1（mg，0.17mmol），或H2（mg，0.17mmol），或H3（mg，0.17mmol），或H4（mg，0.17mmol），或H5（mg，0.17mmol），加入20mL甲醇溶解，缓慢滴加盐酸（1mol/L），室温下搅拌2h。TLC（展开剂为二氯甲烷-甲醇10∶1）监测反应完全后，除去甲醇，醋酸乙酯-水萃取，有机层用饱和碳酸钾溶液调至pH8，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇（15∶1）洗脱得到白色粉末H1～H5。H1：mg（80.9%）；H2：mg（77.4%）；H3：mg（71.6%）；H4：mg（75.8%）；H5：mg（76.6%）。

取对数生长期的RAW.7细胞，用刮刀刮下，离心，吹打细胞制成细胞悬液，在血细胞计数板上进行细胞计数。用培养基将细胞悬液浓度调整至2×个/mL，将此细胞悬液按μL/孔接种于96孔细胞培养板。细胞贴壁4h后，加入1mg/mL化合物，孵育2h后，加入终浓度为10μg/L的LPSμL/孔，对照孔加μL培养基，继续在孵箱中孵育24h。L-NAME（终质量浓度为0.05mg/mL）作为阳性对照药物。取出细胞板，取上清μL/孔置于酶标板中，再加Griess试剂（A液为0.5g磺胺用5%的磷酸溶液溶解并定容至50mL；B液为称取50mgN-1-萘基乙二胺盐酸盐，用三蒸水溶解并定容至50mL；A液与B液分别装在棕色瓶中，临用前二者等体积混合即Giress试剂）μL/孔等体积混合，微型振荡器上振荡1min，于酶标仪nm波长处测定各孔吸光度（A）值，并通过测得的A值得到各化合物对LPS刺激的RAW.7细胞抑制NO释放的浓度。

化合物G1：白色粉末。HR-ESI-MSm/z:.[M＋Na]+。1H-NMR(MHz,C5D5N)δ:9.93(1H,m,-NH-),7.41(1H,t,J=5.4Hz,-NH-CO-),5.59～5.61(1H,m,O-CH-),5.39～5.44(2H,m,N-CH-,H-12),4.96(2H,m,O-CH-,Glu-H-1′),4.60～4.62(1H,m,Glu-H-3′),4.30～4.40(1H,m,Glu-H-2′),4.23～4.28(2H,m,Glu-H-4′,5′),4.02～4.07(2H,m,Glu-H-6′),3.30～4.00(21H,m,8×-CH2-O-,2×-CH2-N-,-CH-O-),3.38～3.41(1H,dd,J=11.4,4.2Hz,H-3),3.21～3.24(2H,m,S-CH2-),3.08～3.11(1H,dd,J=13.2,4.8Hz,H-18),2.90～2.95(2H,m,-CH2-),2.80～2.84(2H,m,-CH2-),1.59(3H,s,CH3),1.33(6H,s,2×CH3),1.27(3H,s,CH3),1.05(3H,t,J=7.2Hz,CH2-CH3),1.02(3H,s,CH3),0.92～0.94(9H,m,3×CH3),0.86(3H,s,CH3)。

化合物G2：白色粉末。HR-ESI-MSm/z:.[M＋Na]+。1H-NMR(MHz,C5D5N)δ:9.93(1H,m,-NH-),7.41(1H,t,J=5.4Hz,-NH-CO-),5.59～5.61(1H,m,O-CH-),5.40～5.44(2H,m,N-CH-,H-12),4.94～4.96(1H,m,O-CH-),4.88(1H,d,J=7.6Hz,Gal-H-1′),4.60～4.61(1H,m,Gal-H-3′),4.46～4.51(3H,m,Gal-H-2′,4′,5′),4.19(1H,dd,J=3.5,9.8Hz,Gal-H-6′a),4.15(1H,t,J=6.1Hz,Gal-H-6′b),3.46～4.00(21H,m,8×-CH2-O-,2×-CH2-N-,-CH-O-),3.38～3.40(1H,dd,J=12.0,4.2Hz,H-3),3.21～3.24(2H,m,S-CH2-),3.08～3.11(1H,dd,J=13.2,4.2Hz,H-18),2.89～2.95(2H,m,-CH2-),2.80～2.84(2H,m,-CH2-),1.59(3H,s,CH3),1.33(3H,s,CH3),1.31(3H,s,CH3),1.28(3H,s,CH3),1.05(3H,t,J=7.2Hz,CH2-CH3),0.99(3H,s,CH3),0.92～0.94(9H,m,3×CH3),0.88(3H,s,CH3)。

化合物G3：白色粉末。HR-ESI-MSm/z:6.[M＋Na]+。1H-NMR(MHz,C5D5N)δ:9.93(1H,m,-NH-),7.41(1H,t,J=5.4Hz,-NH-CO-),5.59～5.61(1H,m,O-CH-),5.39～5.43(2H,m,N-CH-,H-12),4.94～4.96(1H,m,O-CH-),4.84～4.85(1H,d,J=7.8Hz,Xyl-H-1′),4.38～4.41(1H,m,Xyl-H-3′),4.23～4.26(2H,m,Xyl-H-5′),4.16～4.19(1H,m,Xyl-H-2′),4.01～4.07(1H,m,Xyl-H-4′),3.47～4.00(21H,m,8×-CH2-O-,2×-CH2-N-,-CH-O-),3.35～3.37(1H,dd,J=11.4,4.8Hz,H-3),3.21～3.23(2H,m,S-CH2-),3.07～3.10(1H,dd,J=13.2,4.2Hz,H-18),2.90～2.95(2H,m,-CH2-),2.80～2.84(2H,m,-CH2-),1.60(3H,s,CH3),1.32～1.33(6H,m,2×CH3),1.27(3H,s,CH3),1.05(3H,t,J=7.2Hz,CH2-CH3),1.01(3H,s,CH3),0.93～0.94(9H,m,3×CH3),0.90(3H,s,CH3)。

化合物G4：白色粉末。HR-ESI-MSm/z:6.[M＋Na]+。1H-NMR(MHz,C5D5N)δ:9.93(1H,m,-NH-),7.41(1H,t,J=5.4Hz,-NH-CO-),5.60～5.61(1H,m,O-CH-),5.39～5.43(2H,m,N-CH-,H-12),4.94～4.96(1H,m,O-CH-),4.78(1H,d,J=7.1Hz,Ara-H-1′),4.43～4.46(1H,m,Ara-H-3′),4.32～4.34(2H,m,Ara-H-5′),4.23～4.26(1H,m,Ara-H-2′),4.16～4.19(1H,m,Ara-H-4′),3.50～4.20(21H,m,8×-CH2-O-,2×-CH2-N-,-CH-O-),3.33～3.36(1H,dd,J=11.4,4.2Hz,H-3),3.21～3.23(2H,m,S-CH2-),3.08～3.11(1H,dd,J=13.2,3.0Hz,H-18),2.89～2.94(2H,m,-CH2-),2.80～2.84(2H,m,-CH2-),1.60(3H,s,CH3),1.33(3H,s,CH3),1.29(3H,s,CH3),1.26(3H,s,CH3),1.05(3H,t,J=7.2Hz,CH2-CH3),0.98(3H,s,CH3),0.93～0.95(9H,m,3×CH3),0.90(3H,s,CH3)。

化合物G5：白色粉末。HR-ESI-MSm/z:.[M＋Na]+。1H-NMR(MHz,C5D5N)δ:9.93(1H,m,-NH-),7.40(1H,t,J=5.4Hz,-NH-CO-),5.59～5.61(1H,m,O-CH-),5.39～5.44(2H,m,N-CH-,H-12),4.59(1H,m,Rha-H-1′),4.48～4.50(1H,m,Rha-H-3′),4.31～4.35(2H,m,Rha-H-2′,4′),4.23～4.26(1H,m,Rha-H-5′),3.60～4.10(21H,m,8×-CH2-O-,2×-CH2-N-,-CH-O-),3.21～3.24(2H,m,S-CH2-),3.14～3.17(1H,m,H-3),3.08～3.09(1H,m,H-18),2.89～2.95(2H,m,-CH2-),2.79～2.84(2H,m,-CH2-),1.67～1.68(3H,d,J=5.4Hz,CH3),1.59(3H,s,CH3),1.33(3H,s,CH3),1.25(3H,s,CH3),1.06(3H,t,J=7.8Hz,CH2-CH3),0.92～0.94(12H,m,4×CH3),0.88(3H,s,CH3),0.81(3H,s,CH3)。

化合物H1：白色粉末。HR-ESI-MSm/z:.[M＋Na]+。1H-NMR(MHz,C5D5N)δ:9.85(1H,m,-NH-),7.41(1H,t,J=5.4Hz,-NH-CO-),5.80～5.84(1H,m,O-CH-),5.43～5.48(2H,m,N-CH-,H-12),4.95～4.96(1H,d,J=7.8Hz,Glu-H-1′),4.78～4.79(1H,m,O-CH-),4.59～4.61(1H,m,Glu-H-3′),4.40～4.45(1H,m,Glu-H-2′),4.24～4.30(2H,m,Glu-H-4′,5′),4.01～4.09(2H,m,Glu-H-6′),3.50～3.98(21H,m,8×-CH2-O-,2×-CH2-N-,-CH-O-),3.38～3.41(1H,dd,J=11.4,4.2Hz,H-3),3.16～3.27(2H,m,S-CH2-),3.08～3.11(1H,dd,J=13.2,4.2Hz,H-18),2.95～3.00(2H,m,-CH2-),2.67～2.72(2H,m,-CH2-),1.32(3H,s,CH3),1.28(3H,s,CH3),1.00～1.04(6H,m,2×CH3),0.94(3H,s,CH3),0.93(3H,s,CH3),0.92(3H,s,CH3),0.86(3H,s,CH3)。

化合物H2：白色粉末。HR-ESI-MSm/z:.[M＋Na]+。1H-NMR(MHz,C5D5N)δ:9.86(1H,m,-NH-),7.41(1H,t,J=5.4Hz,-NH-CO-),5.79～5.83(1H,m,O-CH-),5.44～5.48(2H,m,N-CH-,H-12),4.88(1H,d,J=7.8Hz,Gal-H-1′),4.78～4.79(1H,m,O-CH-),4.61～4.62(1H,s,Gal-H-3′),4.45～4.52(3H,m,Gal-H-2′,4′,5′),4.19(1H,dd,J=3.5,9.8Hz,Gal-H-6′a),4.15(1H,t,J=6.1Hz,Gal-H-6′b),3.50～4.07(21H,m,8×-CH2-O-,2×-CH2-N-,-CH-O-),3.37～3.40(1H,dd,J=12.0,4.2Hz,H-3),3.16～3.26(2H,m,S-CH2-),3.08～3.11(1H,dd,J=13.2,3.6Hz,H-18),2.95～3.00(2H,m,-CH2-),2.67～2.72(2H,m,-CH2-),1.31(3H,s,CH3),1.28(3H,s,CH3),1.02(3H,t,J=7.2Hz,CH2-CH3),0.98(3H,s,CH3),0.92～0.94(9H,m,3×CH3),0.88(3H,s,CH3)。

化合物H3：白色粉末。HR-ESI-MSm/z:.[M＋Na]+。1H-NMR(MHz,C5D5N)δ:9.86(1H,m,-NH-),7.41(1H,t,J=5.4Hz,-NH-CO-),5.77～5.81(1H,m,O-CH-),5.43～5.46(1H,s,N-CH-,H-12),4.84～4.85(1H,d,J=7.2Hz,Xyl-H-1′),4.75～4.79(1H,m,O-CH-),4.35～4.43(2H,m,Xyl-H-5′),4.22～4.27(2H,m,Xyl-H-2′,3′),4.16～4.20(1H,m,Xyl-H-4′),3.60～4.10(21H,m,8×-CH2-O-,2×-CH2-N-,-CH-O-),3.34～3.37(1H,dd,J=12.0,4.2Hz,H-3),3.17～3.27(2H,m,S-CH2-),3.07～3.10(1H,dd,J=13.2,3.6Hz,H-18),2.95～3.00(2H,m,-CH2-),2.68～2.72(2H,m,-CH2-),1.31(3H,s,CH3),1.27(3H,s,CH3),1.01～1.03(6H,m,2×CH3),0.92～0.94(9H,s,3×CH3),0.89(3H,m,CH3)。

化合物H4：白色粉末。HR-ESI-MSm/z:.[M＋Na]+。1H-NMR(MHz,C5D5N)δ:9.86(1H,m,-NH-),7.41(1H,t,J=5.4Hz,-NH-CO-),5.79～5.83(1H,m,O-CH-),5.42～5.50(2H,m,N-CH-,H-12),5.76～5.81(2H,m,O-CH-,Ara-H-1′),4.45～4.50(1H,m,Ara-H-3′),4.38～4.43(2H,m,Ara-H-5′),4.18～4.22(1H,m,Ara-H-2′),3.47～4.06(22H,Ara-H-4′,8×-CH2-O-,2×-CH2-N-,-CH-O-),3.33～3.35(1H,dd,J=12.0,4.2Hz,H-3),3.15～3.27(2H,m,S-CH2-),3.07～3.10(1H,dd,J=13.2,3.0Hz,H-18),2.95～3.00(2H,m,-CH2-),2.67～2.71(2H,m,-CH2-),1.28(3H,s,CH3),1.26(3H,s,CH3),1.02(3H,t,J=7.2Hz,CH2-CH3),0.96(3H,s,CH3),0.92～0.94(9H,m,3×CH3),0.89(3H,s,CH3)。

化合物H5：白色粉末。HR-ESI-MSm/z:.[M＋Na]+。1H-NMR(MHz,C5D5N)δ:9.86(1H,m,-NH-),7.41(1H,t,J=5.4Hz,-NH-CO-),5.80～5.87(1H,m,O-CH-),5.42～5.51(2H,m,N-CH-,H-12),4.63(1H,s,Rha-H-1′),4.49～4.51(1H,m,Rha-H-3′),4.37～4.41(2H,m,Rha-H-2′,4′),4.33～4.34(1H,m,Rha-H-5′),3.60～4.10(21H,m,8×-CH2-O-,2×-CH2-N-,-CH-O-),3.18～3.25(2H,m,S-CH2-),3.13～3.15(1H,m,H-3),3.07～3.09(1H,m,H-18),2.96～2.98(2H,m,-CH2-),2.62～2.71(2H,m,-CH2-),1.66～1.67(3H,d,J=6.0Hz,CH3),1.24(3H,s,CH3),1.03(3H,t,J=7.2Hz,CH2-CH3),0.93～0.94(6H,m,2×CH3),0.92(3H,s,CH3),0.90(3H,s,CH3),0.87(3H,s,CH3),0.80(3H,s,CH3)。

以金盏花苷E（质量浓度1mg/mL）和L-NAME（质量浓度0.05mg/mL）为阳性对照，在1mg/mL质量浓度下，通过细胞学实验考察了结构类似物G1～G5和H1～H5对LPS刺激的RAW.7细胞产生NO的抑制活性。结果见表1。

生物活性实验结果表明，10个结构类似物在1mg/mL质量浓度下均呈现出不同程度抑制NO产生的抗炎活性，其中化合物G1～G4、H1～H3的活性优于先导化合物金盏花苷E。初步的构效关系研究表明：1）先导化合物金盏花苷E发挥抗炎作用，而苷元部分的28位羧基成酰胺后，得到的类似物均有不同程度的抗炎作用，提示羧基结构并非为抗炎活性的必需基团；2）当金盏花苷E糖基部分的葡萄糖醛酸基替换为葡萄糖基、半乳糖基、木糖基、阿拉伯糖基后，对抗炎活性影响较大，提示该先导物糖基部分对活性产生较大的影响。所半合成的目标化合物均为未见文献报道的化合物，为深入开展先导物金盏花苷E的抗炎活性研究奠定基础，具有深入研究的价值。

参考文献（略）

来源：季宇彬，邓迪，王宝琪，许旭东，田瑜，尚海，楤木单体的结构改造及抗炎活性研究[J].中草药,8,49(7):-.